仪器生产商： Malvern Panalytical Limited

资产编号： S2329180

资产负责人： 吴彩明

购置日期：2023-02-19

仪器产地：美国

仪器供应商：Malvern Panalytical Limited

购买经办人：吴彩明

主要配件： 独立样品池、滴定注射器

主要参数：温控范围：2℃-80℃仪器噪音水平：≤1.4 nW；25℃下温度稳定性：±0.00012℃。

仪器介绍：该仪器主要用于检测分子之间的相互作用，能够快速、高灵敏、自动化地通过一次实验，连续、准确地监测和记录整个实验变化过程的量热曲线，原位、在线和无损伤地提供热力学和动力学信息。它在近生理环境的溶液中对生物分子之间的结合亲和力(KD)、化学计量比 (n)、结合焓变 (ΔH) 和熵变 (ΔS)等相互作用参数进行直接、非标记测定，对样品需求量少且无分子量限制。

应用领域：1、大分子间相互作用：包括抗原与抗体相互作用，分子伴侣与客户蛋白相互作用，蛋白与核酸、核酸与核酸间相互作用，多糖与蛋白间相互作用等； 2、大分子与小分子相互作用：核酸与小分子、蛋白配体与小分子受体及蛋白与多肽药物间的相互作用研究； 3、药物筛选：通过测定药物与靶蛋白间的结合常数来判断二者间结合的强弱，通过测定反应中焓和熵的改变量，可以分析出药物与靶蛋白是以何种方式结合，综合两方面的数据评估二者的相互作用情况； 4、酶促反应动力学：监测酶催化底物水解过程中的热效应，通过计算可以获得底物水解的速率，米氏常数、转换速率常数及焓变等。

管理规则：1、初次使用者，须与管理员确认实验样品符合检测需求，方可进行预约使用； 2、经管理员确认具有独立上机资质用户，可以于任何时段通过免审核预约的方式直接上机使用； 3、使用过程须按照管理员指导的规范进行操作，使用结束后须对仪器进行清洁，并及时关闭仪器； 4、若发现违规者，视情节严重将分别按以下方式进行追责、暂时停用、注销中心测试账户、赔偿仪器维修款、上报学院处分等。

实验规则：检测流动性较高的液体样本，无法检测气态、固态或粘稠度较高的液态样本，一般建议基于水配置的溶液，不接受挥发性的有机溶剂。 1、对于已知解离常数KD，但未知热变化水平的实验：被滴定物浓度要求：10~1000 KD；被滴定物体积要求：400 μl；滴定物浓度要求：必须同时满足大于等于20倍被滴定物浓度且超过KD；滴定物体积要求：100 μl。（备注：若须获得理想数据，建议被滴定物浓度为解离常数的10-1000倍，若由于溶解度等原因浓度无法满足上述要求，可视滴定热变化情况，在满足仪器最低检测量度内使用低浓度检测。） 2、对于未知解离常数KD，且未知热变化水平的实验：被滴定物浓度要求：50 μM及以上；被滴定物体积要求：400 μl；滴定物浓度要求：大于等于20倍被滴定物浓度；滴定物体积要求：100 μl。（备注：样品母液浓度尽量高，可现场稀释，现场须带50 ml相应的buffer来稀释。） 3、滴定物与被滴定物所处的buffer环境完全一致。 经常导致的buffer不一致的原因：（1）缓冲溶液不是同一批，盐浓度和PH都可能存在差异；（2）滴定物母液与实验buffer不一致，稀释过程中引入部分母液中的成分，建议被滴定物也按相应比例引入滴定物母液中的成分；（3）被滴定物源于各种生物方法提取，溶液置换不完全。建议使用凝胶脱盐或超滤等方法置换buffer，收集超滤下的buffer或者凝胶脱盐buffer作为滴定物的稀释buffer。

培训指南：详见文件下载专区。